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用sts-uv微型光谱仪检测dna的吸光度

本文关键词: 生物医药吸光度
摘要

我们通常用紫外吸收光谱来检测生物分子,获得其有关浓度和样品纯度的重要信息。 sts-uv微型光谱仪的波长范围在190-650 nm之间,光学分辨率约为1.5 nm,是此类检测的理想之选。 sts-uv微型光谱仪的体积小巧、功能强大、性能出色,在宽泛的样品浓度范围内能提供优质的紫外吸收数据。 在此应用说明中,我们通过测定浓度在0.15至150 μg/ml之间的dna样品的吸光度,证实该光谱仪的绝佳性能。 

前言

dna检测通常需要测试浓度极高或极低的样品,对于高浓度dna溶液可进行稀释,而低浓度样品的检测难度更大。 没有可调节光程的光谱仪或小容量采样器更具比尔-伯朗定律,可将比色皿的光程调节为适合大小,从而符合测定多种浓度。 sts-uv的动态范围大,信噪比高,能检测浓度范围较大的dna样品,而无需改变光程来适应0.005至1.5吸光度单位(au)范围内的吸光度水平。

appnote-用sts-uv微型光谱仪检测dna的吸光度

实验详细资料

用去离子水制备不同浓度的鲑鱼 dna(sigma d-1626)。 使用1 cm光程比色皿和dh-2000-bal平衡型氘-卤钨组合式光源中的氘灯检测dna的吸光度。

实验结果资料

图1和2中显示了用sts-uv检测低浓度dna(0.15-2.5 μg/ml dna)的吸收光谱和在260 nm(od260)下的吸光度值。 对这些浓度进行的重复测量显示差异率不到0.0004au(误差条在数据标记内)。 用最小二乘法把观测数据拟合成直线,相关系数为0.9999,证实了低浓度数据的线性。 如图1所示,即使当吸光度数值低至0.005 au时,sts-uv也能提供重复性高的优质dna吸收数据。

图1:用sts-uv测量低浓度(0.15-2.5 μg/ml)dna溶液的吸光度。

图1:用sts-uv测量低浓度(0.15-2.5 μg/ml)dna溶液的吸光度。

图3进一步证实用sts-uv检测0.15-110 μg/mldna具有较好的线性和较宽的动态范围。 r2(线性拟合度)值为0.9996,说明了在这一宽泛的浓度和吸光度范围内数据具有线性关系。 当浓度为110 μg/ml时,吸光度曲线略微平坦化或衰减说明在100至110 μg/ml之间吸光度具有线性,约为1.6 au。

图2:od260处对应dna浓度(0.15至2.5 μg/ml dna水溶液)

图2:od260处对应dna浓度(0.15至2.5 μg/ml dna水溶液)

图4显示了用sts-uv检测的最大吸光度。 检测出吸光度数值高达2.1 au。 正如红色的数据所示,在100和110 μg/ml之间dna的od260表现出较高的线性,约为1.6 au。 当浓度超过100 μg/ml,光谱图平坦化或衰减说明了这些测量结果接近杂散光限值。

 

图3:od260与dna浓度(0.15至110 μg/ml dna水溶液)

图3:od260与dna浓度(0.15至110 μg/ml dna水溶液)

图4:od260与dna浓度(0.15至150 μg/ml dna水溶液)

图4:od260与dna浓度(0.15至150 μg/ml dna水溶液)

结论

sts-uv的动态范围为4600:1,信噪比超过1500:1,它将出色的性能融入体积小巧、功能强大的微型光谱仪中。 sts-uv是dna、rna和蛋白质检测的理想之选,覆盖了190至650 nm的整个范围,光学分辨率约为1.5 nm。 正如浓度在0.15至150 μg/ml之间的dna样品所示,sts-uv能对宽泛的吸光度范围(0.005至2.1 au)进行检测。 sts-uv能在宽泛的浓度和吸光度范围能进行检测,无需配备可调节的采样配件,从而简化了紫外吸收光谱的检测过程。

 

")); 光纤光谱仪
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