sts作为市面上最小的微型光纤光谱仪之一,具有低噪声,高信噪比的特征。光学分辨率可达1nm(fwhm)。它针对oem和大量的需要监视一个或多个波长并且客户寻求高重现性的应用。在生命科学,医疗诊断,固态照明和环境分析等这些行业中,sts是具有吸引力的对基于滤光片的光学传感系统和其它微型光谱仪的替代品。
我们通常用紫外吸收光谱来检测生物分子,获得其有关浓度和样品纯度的重要信息。 sts-uv微型光谱仪的波长范围在190-650 nm之间,光学分辨率约为1.5 nm,是此类检测的理想之选。 sts-uv微型光谱仪的体积小巧、功能强大、性能出色,在宽泛的样品浓度范围内能提供优质的紫外吸收数据。 在此应用说明中,我们通过测定浓度在0.15至150 μg/ml之间的dna样品的吸光度,证实该光谱仪的绝佳性能。
前言
dna检测通常需要测试浓度极高或极低的样品,对于高浓度dna溶液可进行稀释,而低浓度样品的检测难度更大。 没有可调节光程的光谱仪或小容量采样器更具比尔-伯朗定律,可将比色皿的光程调节为适合大小,从而符合测定多种浓度。 sts-uv的动态范围大,信噪比高,能检测浓度范围较大的dna样品,而无需改变光程来适应0.005至1.5吸光度单位(au)范围内的吸光度水平。
实验详细资料
用去离子水制备不同浓度的鲑鱼 dna(sigma d-1626)。 使用1 cm光程比色皿和dh-2000-bal平衡型氘-卤钨组合式光源中的氘灯检测dna的吸光度。
实验结果资料
图1和2中显示了用sts-uv检测低浓度dna(0.15-2.5 μg/ml dna)的吸收光谱和在260 nm(od260)下的吸光度值。 对这些浓度进行的重复测量显示差异率不到0.0004au(误差条在数据标记内)。 用最小二乘法把观测数据拟合成直线,相关系数为0.9999,证实了低浓度数据的线性。 如图1所示,即使当吸光度数值低至0.005 au时,sts-uv也能提供重复性高的优质dna吸收数据。
图1:用sts-uv测量低浓度(0.15-2.5 μg/ml)dna溶液的吸光度。
图3进一步证实用sts-uv检测0.15-110 μg/mldna具有较好的线性和较宽的动态范围。 r2(线性拟合度)值为0.9996,说明了在这一宽泛的浓度和吸光度范围内数据具有线性关系。 当浓度为110 μg/ml时,吸光度曲线略微平坦化或衰减说明在100至110 μg/ml之间吸光度具有线性,约为1.6 au。
图2:od260处对应dna浓度(0.15至2.5 μg/ml dna水溶液)
图4显示了用sts-uv检测的最大吸光度。 检测出吸光度数值高达2.1 au。 正如红色的数据所示,在100和110 μg/ml之间dna的od260表现出较高的线性,约为1.6 au。 当浓度超过100 μg/ml,光谱图平坦化或衰减说明了这些测量结果接近杂散光限值。
图3:od260与dna浓度(0.15至110 μg/ml dna水溶液)
图4:od260与dna浓度(0.15至150 μg/ml dna水溶液)
结论
sts-uv的动态范围为4600:1,信噪比超过1500:1,它将出色的性能融入体积小巧、功能强大的微型光谱仪中。 sts-uv是dna、rna和蛋白质检测的理想之选,覆盖了190至650 nm的整个范围,光学分辨率约为1.5 nm。 正如浓度在0.15至150 μg/ml之间的dna样品所示,sts-uv能对宽泛的吸光度范围(0.005至2.1 au)进行检测。 sts-uv能在宽泛的浓度和吸光度范围能进行检测,无需配备可调节的采样配件,从而简化了紫外吸收光谱的检测过程。